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021-54479081
021-54461587
人庚肝抗體(HGVAb)ELISA試劑盒僅供研究使用。
藥品名稱(chēng):
通用名:人庚肝抗體(HGVAb)酶聯(lián)免疫分析試劑盒
使用目的:
本試劑盒用于定性測定人血清,血漿及相關(guān)液體樣本中庚肝抗體(HGVAb)。
實(shí)驗原理
本試劑盒采用間接法測定標本中人庚肝抗體(HGVAb)。用純化的庚肝抗原包被微孔板,制成固相抗原,與樣品中庚肝抗體(HGVAb)溫育后,加入生物素標記的抗IgG抗體,再與鏈霉親和素-HRP結合,形成免疫復合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的。用酶標儀在450nm波長(cháng)下測定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較,從而判定標本中人庚肝抗體(HGVAb)的存在與否。,
試劑盒組成
1
20倍濃縮洗滌液
50ml×1瓶
8
樣品稀釋液
6ml×1瓶
2
鏈霉親和素-HRP
6ml×1瓶
9
陰性對照
0.5ml×1瓶
3
酶標包被板
12孔×8條
10
陽(yáng)性對照
0.5ml×1瓶
4
生物素標記的抗-IgG抗體
6ml×1瓶
11
密封袋
1個(gè)
5
顯色劑A液
6ml×1瓶
12
封板膜
3張
6
顯色劑B液
6ml×1/瓶
13
說(shuō)明書(shū)
1份
7
終止液
6ml×1瓶
標本要求
1.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
2.標本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻進(jìn)行,提取后應盡快進(jìn)行實(shí)驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
操作步驟
1. 編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照2孔、陽(yáng)性對照2孔、空白對照1孔
2. 加樣:分別在陰、陽(yáng)性對照孔中加入陰性對照、陽(yáng)性對照50μl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,37℃溫育45分鐘。
3. 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
4. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復4次,拍干。
5. 加生物素標記的抗-IgG抗體:每孔加入生物素標記的抗-IgG抗體50μl。37℃溫育30分鐘
6. 洗滌:操作同4。
7. 加鏈霉親和素-HRP:每孔加入50μl的鏈酶親和素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
8. 洗滌:操作同4。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A 50μl,再加入顯色劑B 50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時(shí)藍色立轉)。
11. 測定:以空白空調零,450nm波長(cháng)依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以?xún)冗M(jìn)行。
結果判定:
試驗有效性:陽(yáng)性對照孔平均值≥1.00; 陰性對照平均值≤0.10
臨界值(CUT OFF)計算:臨界值=陰性對照孔平均值+0.15
陰性判定:樣品OD值< 臨界值(CUT OFF)者為人庚肝抗體(HGVAb)陰性
陽(yáng)性判定:樣品OD值≥ 臨界值(CUT OFF)者為人庚肝抗體(HGVAb)陽(yáng)性
注意事項
1.操作嚴格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行,本試劑不同批號組分不得混用。
2.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開(kāi)封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
3.濃洗滌液可能會(huì )有結晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結果。
4. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
5.底物請避光保存。
6.試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準,使用雙波長(cháng)檢測時(shí),參考波長(cháng)為630nm
7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。終止液為2M的硫酸,使用時(shí)必須注意安全。
規格:
96人份/盒
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6個(gè)月