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目前ELISA試劑盒檢查的樣本中,除了細胞上清外,還有比較大的一部分是血清和血漿樣本。關(guān)于ELISA試劑盒客戶(hù)來(lái)說(shuō),在試驗中可能用到不一樣的樣本,怎么區分所購的ELISA試劑盒能否測手中的樣本呢?關(guān)于zui常見(jiàn)的細胞上清,我們我們知道,培育細胞進(jìn)程中,無(wú)格外狀況通常是10%的牛血清參加培育基中,通過(guò)培育后,細胞的吸收耗費,zui終細胞上清中蛋白含量會(huì )很少,并且關(guān)于通常牛血清出產(chǎn)的廠(chǎng)家來(lái)說(shuō),在出產(chǎn)進(jìn)程中現已去除了,所以對通常ELISA而言,不會(huì )影響抗體抗原的結合。
1、如ELISA試劑盒廠(chǎng)家沒(méi)有供給專(zhuān)門(mén)用于血清血漿樣本的緩沖液,那么只要用已知濃度的待測目標蛋白參加所測種屬的血清作為樣本加樣和用已知濃度的待測目標蛋白參加PBS緩沖液中一起檢查比照,ELISA試劑盒即可知道該試劑盒是不是可以直接用來(lái)測血清血漿樣本。
2、如廠(chǎng)家沒(méi)有供給專(zhuān)門(mén)用于血清血漿樣本的緩沖液,只是有一個(gè)抽象的或一致的稀釋液,那么只要用已知濃度的待測目標蛋白參加所測種屬的血清直接加樣和用已知濃度的待測目標蛋白參加廠(chǎng)家供給的一致的緩沖液中一起檢查,也可得出該試劑盒是不是可直接用來(lái)檢查血清血漿樣本。
3、如廠(chǎng)家供給專(zhuān)門(mén)用于血清血漿樣本的緩沖液,可用已知濃度的待測目標蛋白參加所測種屬的血清直接加樣和用緩沖液按說(shuō)明書(shū)分別加樣,也可得出成果。
如該種類(lèi)型ELISA試劑盒樣本總量如為100μl的話(huà),通常而言,會(huì )是50μl的樣本加樣量和50μl的特定的緩沖液。
在運用ELISA試劑盒的進(jìn)程,可將已知濃度的蛋白用血清或血漿調配到試劑盒標定的檢查限的zui高值的2倍,參加50μl做兩孔,一孔補入慣例的50μl規范品稀釋液,ELISA試劑盒一孔補入50μl樣本剖析緩沖液,即可區分出作用來(lái),有時(shí)候,有些廠(chǎng)家為了到達“消除”的作用,在樣本剖析緩沖液中參加待測目標蛋白,為了鑒別出這種狀況,也可直接參加樣本剖析緩沖液做一孔,一起做比照,這么可試出試劑盒中的對于血清血漿樣本的緩沖液是不是真的有用。