常見(jiàn)的免疫檢測技術(shù)

常見(jiàn)的免疫檢測技術(shù)

（一）皮內試驗 （intrader rpmal test,ID） 宿主在病原體刺激后，體內產(chǎn)生親細胞性抗體（IgE和IgG4）。當其與相應抗原結合后，肥大細胞和嗜堿性粒細胞脫顆粒，釋放生物活性物質(zhì)，引起注射抗原的局部皮膚出現皮丘及紅暈，以此便可判斷體內是否某有種特異性抗體存在。

（二）免疫擴散（immunodiffusion）和免疫電泳（immunoelectrophoresis）

1．免疫擴散 于一定條件下，抗原與抗體在瓊脂凝膠中相遇，在二者含量比例合適時(shí)形成肉眼可見(jiàn)的白色沉淀。本法有兩種類(lèi)型：①單相免疫擴散：將一定量的抗體混入瓊脂凝膠中，使抗原溶液在凝膠中擴散而形成沉淀環(huán)，其大小與抗原量成正比；②雙相免疫擴散：將抗原與抗體分別置于凝膠板的相對位置，二者可自由擴散并在中間形成沉淀線(xiàn)。用雙相免疫擴散法既可用已知抗原檢測未知抗體，也可用已知抗體檢測未知抗原。

2．免疫電泳 是將免疫擴散與蛋白質(zhì)凝膠電泳相結合的一項技術(shù)。事先將抗原在凝膠板中電泳，之后在凝膠槽中加入相應抗體，抗原和抗體雙相擴散后，在比例合適的位置，產(chǎn)生肉眼可見(jiàn)的弧形沉淀線(xiàn)。

（三）酶聯(lián)免疫吸附試驗 （enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）

vvv 酶聯(lián)免疫吸附試驗原理是將抗原或抗體與底物（酶）結合，使其保持免疫反應和酶的活性。把標記的抗原或抗體與包被于固相載體上的配體結合，再使之與相應的無(wú)色底物作用而顯示顏色，根據顯色深淺程度目測或用酶標儀測定OD值判定結果。

（四）間接熒光抗體試驗 （indirect fluorescent antibody method，IFA）

vvv 本法用熒光素（異硫氰基熒光素）標記第二抗體，可以進(jìn)行多種特異性抗原抗體反應，即可檢測抗原又可檢測抗體。本法具有較高的敏感性、特異性和重現性等優(yōu)點(diǎn)，除可用于寄生蟲(chóng)病的快速診斷，流行病學(xué)調查和疫情監測外，還可用于組織切片中抗原定位以及在細胞和亞細胞水平觀(guān)察和鑒定抗原、抗體和免疫復合物。

（五）對流免疫電流試驗 （counter-immunoelectrophoresis，CIE） 對流免疫電泳試驗是以瓊脂或瓊脂糖凝膠為基質(zhì)的一種快速，敏感的電泳技術(shù)。既可用已知抗原檢測抗體，又可用已知抗體檢測抗原。反應結果可信度高，適用范圍廣。以本法為基礎改進(jìn)的技術(shù)有酶標記抗原對流免疫電泳（enzyme-linked antigen counterimmunoelectrophoresis,ELACIE ）和放射對流免疫電泳自顯影（radio-immuno-counterelectrophoretic autography，RCIEPA）等技術(shù)。二者克服了電泳技術(shù)本身不夠靈敏的弱點(diǎn)。

（六）免疫印跡試驗（immunobloting technique，ELIB） 免疫印跡試驗又稱(chēng)免疫印漬或western blot，是由十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酸胺凝膠電泳（SDS-PAGE），電轉印及固相酶免疫試驗三項技術(shù)結合為一體的一種特殊的分析檢測技術(shù)。本法具有高度敏感性和特異性。